今天为大家分析2024年细胞免疫治疗在实体瘤中的应用进展，主要包括：CAR-T细胞疗法、TCR-T细胞疗法、TIL细胞疗法、CIK细胞疗法及NK细胞细胞疗法。

（一）CAR-T细胞疗法

嵌合抗原受体（chimeric antigen receptor，CAR） 修饰的T细胞疗法（CAR-T疗法），是典型基因工程介导的免疫细胞疗法。CAR是一种人工构建的细胞表面受体，由能够识别肿瘤抗原的胞外单链抗体可变区和胞内信号传导区域组成。T细胞过表达CAR分子后，能识别瘤细胞表面肿瘤抗原并被激活， 从而特异性杀伤瘤细胞。

CAR-T细胞在实体瘤中的应用 根据从ClinicalTrials.gov获取的数据，截至2022年4月，在实体瘤领域有超过700项在研的以CAR-T为代表的细胞疗法临床研究。肿瘤相关抗原（tumor-associated antigen，TAA）、HER2和间皮素（mesothelin， MSLN）仍是实体瘤细胞治疗领域最常见靶点。而一些新兴靶点相对于2021年显示出大幅增长，包括CLDN18（+400%）、CD276（+160%） 和KRAS（+125%）。

关于CAR-T细胞疗法，首先来看一条来自央视的报道：世界首例被CAR-T细胞疗法一针治愈的肝癌患者，已重返临床工作一线。

靶向Claudin18.2自体CAR-T细胞候选产品CT041的临床试验CT041-CG4006 （NCT03874897）最终结果于2024年6月3日在线发表于《Nature Medicine》杂志，并且该结果于2024年6月3日在ASCO上进行口头报告。

该研究一项单臂、开放标签的I期临床试验，旨在评估CT041在Claudin18.2阳性的晚期消化系统肿瘤患者中的安全性和有效性。2019年3月26日至2022年1月21日期间进行患者入组，共有98例患者接受了CT041输注。截至数据截止日期（2024年1月26日），中位随访时间为32.4个月（95% CI，27.3–36.5个月），最长随访时间为41.0个月。

结果显示，CT041治疗的整体耐受性良好，未观察到剂量限制性毒性（DLTs），也未发现长期随访相关并发症。其安全性特征与之前报告的结果基本一致，随访期间未发现新的安全性事件。95例（96.9%）患者出现1级或2级细胞因子释放综合症（CRS），未观察到3级或以上的CRS。未观察到免疫效应细胞相关神经毒性综合征（ICANS）、噬血细胞性淋巴组织细胞增多症（HLH）或治疗相关死亡。

98例患者中有90例（91.8%）基线有靶病灶，其中70例患者显示肿瘤不同程度的肿瘤退缩。在51例CT041单药治疗、存在靶病灶的胃癌/食管胃结合部腺癌患者中，ORR和DCR分别为54.9%（28/51）和96.1%（49/51），mDOR为6.4个月。在所有接受CT041单药治疗的胃癌/食管胃结合部腺癌患者（n=59）中，中位无进展生存期（mPFS）为5.8个月，中位总生存期（mOS）为9.0个月，12个月的生存率为37.3%。临床获益人群（即CR/PR+SD≥6个月）（n=36）的生存获益更加显著，中位无进展生存期（mPFS）为8.4个月（vs 2.6个月，P <0.0001），中位总生存期（mOS）为12.5个月（vs 4.0个月，P = 0.0036）。此外，Claudin18.2高表达且无肝转移或骨转移的胃癌/食管胃结合部腺癌患者（n=35）也显示出更加显著的治疗获益，mPFS和mOS分别为8.4个月（vs 3.7个月，P = 0.00002）和13.1个月（vs 6.3个月，P = 0.0028）。

CT041目前正在进行的试验还有研究者发起的临床试验(CT041-CG4006, NCT03874897)，在中国开展的针对晚期胃癌/食管胃结合部腺癌的确证性Ⅱ期临床试验(CT041-ST-01, NCT04581473)，在中国开展的针对胰腺癌辅助治疗的Ⅰ期临床试验(CT041-ST-05, NCT05911217)，以及在北美开展的针对晚期胃癌或胰腺癌的1b/2期临床试验(CT041-ST-02, NCT04404595)。

（2）GUCY2C （GCC）

GUCY2C即鸟苷酸环化酶 C，又称GC-C，或STa受体/STaR，是一种在肠上皮细胞上表达的跨膜受体，属于鸟苷酸环化酶家族中的一员，是鸟苷酸、尿鸟苷酸和大肠杆菌肠毒素的受体。GUCY2C由GUCY2C基因编码，其蛋白结构由胞外结构域、跨膜区和胞内结构域三大部分组成，属于I型跨膜蛋白。

GUCY2C结构

GUCY2C-cGMP信号轴

①2024年ASCO会议上，北京大学肿瘤医院的齐长松教授对于上述试验进行了深度解读。齐教授讲：相较于2023年ESMO大会上公布的9例患者数据，截至今年美国临床肿瘤学会（ASCO）大会投稿时，本研究已入组了20例患者。其中，包括剂量爬坡阶段的12例患者和剂量扩展阶段的8例患者。这一数据量的显著扩增为我们提供了更为丰富的临床数据支持。

在剂量扩展队列中，观察到了更佳的治疗效果。2023年ESMO大会上，9例患者中仅有1例达到客观缓解。此次更新的数据中，特别是在高剂量组（即第3和第4个剂量组），客观缓解率能够达到大约38%，接近40%。与目前已获批的结直肠癌标准3线治疗相比，本研究中的客观缓解率有了近10倍的增长，显示了GUCY2C CAR-T疗法IM96的巨大潜力和优势。

②另一款针对GCC的GCC19 CART细胞疗法，也取得了优异成绩。其客观缓解率较美国标准疗法提高30倍！

GCC19CART是我国自主研发的一款以GCC为靶点的自体CAR-T产品，主要用于治疗复发/难治性转移性结直肠癌。GCC19CART旨在通过将实体瘤CAR-T细胞与靶向CD19的CAR-T细胞配对，来克服传统CAR T细胞在实体瘤恶性肿瘤中的局限性，以放大实体瘤CAR-T成分的增殖和激活，目前美国临床试验CARAPIA-1（NCT05319314）正在进行中。

在2024年5月8日，美国基因与细胞治疗学会（ASGCT）第27届年会上，重点介绍一项在中国进行的Ⅰ期2个剂量爬坡临床试验的数据。本研究共入组21例复发性或难治性转移性结直肠癌患者，将其分为两组，即1级剂量组（13例，1x106 CAR-T/kg）、2级剂量组（8例，2x106 CAR-T/kg）。先给予白细胞去除术、淋巴细胞清除化疗（环磷酰胺+氟达拉滨），之后再进行GCC19CART回输治疗，结果显示：

1、客观缓解率（ORR）：根据实体肿瘤疗效评价标准（RECIST1.1），两个剂量组的综合总客观缓解率(ORR)达28.6%（6/21），即6例患者经CAR-T治疗后，肿瘤体积缩小达30%。其中，1级剂量组的ORR达15.4%(2/13)，而2级剂量组的ORR达50%(4/8)。

值得一提的是，2级剂量组的中位随访时间（mOS）已超过2年（24个月），mOS要明显优于美国FDA批准的标准三线药物（其mOS仅为6-8个月）。

2、中位总生存期（OS）：1级剂量组的中位总生存期（OS）为13.3个月，而2级剂量组的中位OS为18.3个月。

3、中位无进展生存期（PFS）：1级剂量组的中位无进展生存期（PFS）为1.9个月，而2级剂量组的中位PFS为6.3个月。

总之，上述初步结果表明，GCC19CART在治疗复发性或难治性转移性结直肠癌中，显示出与治疗剂量相关的良好疗效，且安全性可控。

详见CAR-T细胞疗法一针治愈越来越多种类的肿瘤而不再限于血液肿瘤

（3）GPC3 肝癌

GPC3全称Glypican-3，是硫酸乙酰肝素蛋白聚糖家族的成员，GPC3由核心蛋白和硫酸乙酰肝素链组成，通过调节Wnts、Hedgehogs、成纤维细胞生长因子-2 (FGF-2)和骨形态发生蛋白(BMPs)的活性在细胞生长和分化中发挥重要作用，研究发现当GPC3表达提高后，促进C-myc的表达，形成正反馈信号回路，最终导致HCC的发生与发展。GPC3主要表达于多种恶性实体肿瘤中特异性高表达（如肝细胞癌、鳞状非小细胞肺癌、食管鳞状细胞癌等），几乎不表达于健康成年人中，而且以可溶形式（sGPC3）释放到外周，结合AFP，可进一步提高肝脏肿瘤无创诊断的敏感性。因此，GPC3成为HCC的新的诊断和治疗靶点。

截至2024年3月14日，研究中有24名患者中的23名符合有效性评估的条件。在中位5.82个月随访期间，在22例可评估疗效患者中，有90.9%的患者出现包含肝内与肝外的肿瘤缩小，中位缩小幅度为44.0%（范围：3.4-94.4%）。接受所有剂量水平治疗患者的疾病控制率为90.9%，客观缓解率为50.0%。在接受剂量水平4的患者中，其ORR达57.1%。

所有患者的安全性均可评估。试验中未观察到剂量限制性毒性和免疫效应细胞相关神经毒性综合征（ICANS）事件。22名（91.7%）患者出现细胞因子释放综合征（CRS），仅1名（4.2%）为3级CRS。最常见的≥3级不良反应是淋巴细胞减少（100%）、中性粒细胞减少（70.8%）、血小板减少（37.5%）和转氨酶升高（16.7%）。所有不良反应均为可逆。

（4）上皮细胞黏附分子（EpCAM）

EpCAM是一种保守的I型跨膜糖蛋白，大小为35kDa，在高等真核生物的上皮细胞上表达。它最初被发现是一种癌细胞表面抗原，此后作为癌症标志物在诊断、预后和治疗干预方面的应用获得了巨大的重要性。其在多种上皮细胞来源的肿瘤中高表达，特别在消化系统恶性肿瘤中高表达，且表达均一（表达率90%），而在正常组织中表达量较低。

IMC001是一种自体 EpCAM 靶向 CAR-T 细胞，其开发旨在通过靶向EpCAM，解决转移和复发难题，为晚期消化系统肿瘤提供一种新的治疗选择。在2024年ASCO大会上公布了IMC001的研究结果。

自2021年8月18日至2023年5月8日，共有11例患者接受了IMC001 CAR-T细胞输注。截止日期（2024年3月31日），在至少进行了一次疗效评估的10例患者中，IMC001输注显示出了良好的安全性和90%的疾病控制率。低剂量组中有1例患者（占1/3，33.3%）和中等剂量组中有2例患者（占2/5，40%）实现了部分缓解（PR）。中等剂量组中有3例的患者在研究截止时已存活超过10个月，其中有1例患者在第24周时确认达到了PR，并在第27周进行了根治性胃切除手术，至截止日期已存活超过22个月。

（5）B7-H3

B7-H3（也称为CD276）是一种免疫检查点分子，在正常组织中无表达或低表达，而在胶质母细胞瘤，卵巢癌，非小细胞肺癌，鳞状细胞癌，黑色素瘤和其他恶性实体瘤中具有高表达。B7-H3促进肿瘤转移，和不良临床预后相关。因此，B7-H3可作为细胞免疫的理想靶点。

（6）受体酪氨酸激酶样孤儿素受体1（ROR1）

受体酪氨酸激酶样孤儿素受体1（ROR1）是ROR 受体家族一员，包含两个密切相关的I 型跨膜蛋白ROR1和ROR2。ROR家族属Wnt信号通路，并与MuSK（肌肉特异性激酶）和Trk（原肌球蛋白） 家族受体密切相关。

ROR1可通过介导非经典Wnt信号通路（non-canonical Wnt pathways）的信号传递，在多种生理过程发挥重要作用，其中包括调节细胞分裂、增殖、迁移和细胞趋化，尤其是Wnt5a。作为Wnt5a的受体，ROR1参与激活瘤细胞NF-κB通路。ROR1在人正常组织中低表达或不表达，但在多种恶性肿瘤或组织中高表达，如MCL、慢性淋巴细胞白血病（CLL）、乳腺癌、卵巢癌、黑色素瘤、肺腺癌等。

一项正在Fred Hutchinson肿瘤研究中心（NCT02706392）开展临床研究， 评估了抗ROR1的CAR-T细胞在ROR1阳性、晚期NSCLC和三阴性乳腺癌的安全性，在30例入组患者中，至少6例未见剂量限制性毒性；而Oncternal Therapeutics 开发的CAR-T疗法ONCT-808在今年即将申报IND；另外，JUNO Therapeutics和BMS联合研发的一款自体ROR1 CAR-T细胞疗法JCAR024，目前处临床Ⅰ期，用于治疗ROR1阳性血液肿瘤和实体瘤，包含非小细胞肺癌、三阴性乳腺癌、CLL、MCL和ALL。

（二）TCR-T细胞疗法

T 细胞是获得性抗肿瘤免疫的重要细胞亚群。T细胞通过其表面的T细胞受体（TCR）特异性识别主要组织相容性复合体（MHC）分子与肿瘤抗原形成的 MHC-抗原肽复合物（pMHC），启动针对肿瘤细胞的特异性杀伤功能。TCR包括αβ和 γδ两种异源二聚体，其中TCRαβ占TCR 总量的95%以上。

过继性T细胞免疫治疗通过体外富集、扩增肿瘤特异性T细胞，将其回输至自体患者体内，以达杀伤肿瘤的目的。扩增的T细胞既可来自于肿瘤浸润淋巴细胞（tumor-infiltrating lymphocytes，TILs）,也可来自经基因改造的外周血 T 细胞，如嵌合抗原受体T细胞（chimeric antigen receptor T-cell，CAR-T）、 T细胞受体工程化T细胞（T-cell receptor engineering T cell， TCR-T）。过继性T细胞治疗最早应用于同种异体造血干细胞移植治疗白血病，能够显著降低患者复发率。自 1998 年开展 TILs 治疗转移性恶性黑色素瘤的临床研究，2006年以黑色素瘤抗原-1（melanoma antigen recognized by T cells 1，MART-1）作为靶抗原的TCRT用于恶性黑色瘤治疗。

2024年8月1日，Adaptimmune宣布其TCR-T疗法Afami-cel，获得FDA批准上市，用于晚期滑膜肉瘤的治疗，其也成为全球首个获批上市的TCR-T细胞疗法。

该药物的获批上市主要是基于SPEARHEAD-1临床试验数据，并且关键数据已同步发表在国际权威期刊《柳叶刀》上。

SPEARHEAD-1研究共纳入了52例既往接受过3种治疗方案失败的晚期难治性肉瘤患者（44例滑膜肉瘤、8例粘液样圆细胞脂肪肉瘤）。入组患者接受Afami-cel治疗后，经过32.6个月的中位随访，结果显示：

1、总体缓解率（ORR）：全部入组患者的ORR为37%；其中，滑膜肉瘤患者ORR为39%，粘液样圆细胞脂肪肉瘤的ORR为25%。结果意味着近40%的晚期肉瘤患者，经Afami-cel治疗后，肿瘤显著缩小（超过30%）甚至消失。

2、中位总生存期（OS）：中位总生存期（OS）为17个月，明显优于历史对照数据。对于缓解患者2年OS预计高达70%。这也意味着，近70%的患者生存超过2年。

Adaptimmune上市的一次性治疗药物TECELRA，标价为727,000美元（合520万人民币），直接超越了5月份CAR-T的最贵记录120万，TIL的370万，较CAR-T价格甚至还一下翻了四倍多。这是美国治疗癌症的细胞药物中每剂成本最昂贵的。

TECELRA是一种MAGE-A4定向的基因修饰的自身T细胞免疫疗法，适用于治疗患有不可切除或转移性滑索肉瘤的成年人，这些人曾接受过既往化疗，HLA-A*02:01 P、-A*02:02 P、-A*02:03 P或-A*02:06 P阳性，其肿瘤表达MAGE-A4抗原（FDA批准或批准的配套诊断设备）。

2024年第115届美国癌症研究协会（AACR）年会于4月5日至10日在美国圣地亚哥召开。大会上报告了TCR-T治疗相关治疗成果。

TCR-T疗法和CAR-T异同

相同点：

①两者都是通过基因改造的手段提高T细胞受体对特异性癌症细胞抗原的识别能力和进攻能力，因此都被统称为“T细胞受体重新定向”技术；

②治疗流程类似，都是对患者自身的T淋巴细胞进行体外改造，然后回输到患者体内。

不同点：

两者抗肿瘤反应的主要区别在于T细胞识别抗原时是否需要组织相容性复合体（MHC）参与。

TCR分子属于免疫球蛋白的一个超家族，由两个共价结合的多态性亚单位组成，每个亚单位都是抗原特异性的，它们至少与四种不同类型的信号转导链有关。为了激活T细胞，TCR和主要组织相容性复合体（MHC）之间必须存在相互作用。TCRs与pMHC（peptide-MHC）相互作用的强弱决定了未成熟胸腺细胞的命运，对幼稚T细胞的存活至关重要。因此，TCR-T免疫治疗技术通过与MHC特别是Ⅱ类分子的有效相互作用激活宿主的免疫系统。TCR-T细胞可以识别细胞内的肿瘤特异性抗原，而CAR-T细胞主要识别肿瘤表面的特异性抗原。这使得TCR-T细胞在肿瘤治疗中更有效。

CAR包含肿瘤抗原靶向的单链抗体、跨膜结构域和CD3ζ的胞内激活结构域。通过这种方式，工程化的CAR能够识别特定的肿瘤相关抗原，CAR能够在不经过MHC处理的情况下结合未经处理的肿瘤表面抗原。

TCR-T具有三大优点：

①靶向性强：TCR-T所使用的抗原可以为精挑细选的肿瘤特异性抗原，不受是否表达在细胞表面的限制，可以为细胞内抗原，对肿瘤细胞的精准靶向性更强。

②渗透性好，TCR-T更容易向实体瘤内部渗透；

③稳定性优，CR-T引入的是完全人源化的结构不易引起机体的免疫排斥，抗抗体产生的概率低。

TCR-T细胞疗法在治疗实体瘤方面展现了前所未有的潜力，凭借其能够靶向肿瘤内多种抗原的优势，逐渐吸引越多越多的人关注。

针对肿瘤相关抗原（TAA分子）TCR-T的小范围患者试验结果，在多项针对膜细胞肉瘤和转移性黑色素瘤患者临床试验用药后的观察，发现都在大约50%的患者观察到了肿瘤对于治疗的临床响应，即治疗导致了病情进展减缓或稳定，或出现不同程度的缓解，证实了治疗能够导致一定的治疗效果。

针对病毒抗原的TCR-T的结果显示

在2017年开展的一项采用HPV特异性TCR-T细胞治疗包括宫颈癌等癌种的12例患者，结果6名患者表现出肿瘤完全或部分缓解，其中3名患者观察到1个或多个肿瘤病灶的完全消除。

2021年报道两例HBV相关肝细胞癌(HCC)患者，在接受了HBV抗原特异性TCR-T治疗后，肿瘤标志物甲胎蛋白都显著降低，其中1例患者的6个肺部转移病灶中有5个显著缩小。

2020年美国临床肿瘤学会（ASCO）年会上公布了TCR-T细胞疗法在滑膜肉瘤（SS）Ⅰ期试验中表现出了良好的肿瘤缓解（NCT03132922）。并且在而2023年1月9日发表在Nature Medicine（IF=87.241)期刊上的更新数据显示，afami-cel在SS患者亚组中实现了44%的客观缓解率，而所有癌症类型的总体缓解率为24%。

共有38例患者在研究中接受了afami-cel治疗，平均既往治疗线数为3。患者中58%为男性；92%的患者为白人，其余为亚裔。该研究纳入了16例滑膜肉瘤患者，9例卵巢癌，3例头颈部癌，食管癌、非小细胞肺癌、尿路上皮癌和黏液样/圆细胞脂肪肉瘤各2例，胃癌和黑色素瘤各1例。ORR（均为部分缓解）为24%（9/38），SS患者的ORR为44%（7/16），所有其他癌症患者的为9%（2/22）。所有患者和SS患者的中位缓解持续时间分别为25.6周（95%CI：12.286，未达到）和28.1周（95%CI：12.286，未达到）。所有患者（N=38，9种肿瘤类型）均发生≥3级血液学毒性；55%的患者发生细胞因子释放综合征（90%≤2级）。17例患者（45%）在afami-cel治疗后4周发生持续的血细胞减少。2例患者发生试验相关死亡。

在一项III期临床试验中，Kimmtrak与其他疗法（82%帕博利珠单抗；12%伊匹木单抗；6%达卡巴嗪）相比，Kimmtrak单药在总生存期（OS）方面更具优势：Kimmtrak组的中位OS为21.7个月，对照组为16.0个月，患者的死亡风险降低了49%。在安全性方面良好，Kimmtrak组并没有出现4级以上毒副作用。基于此，2022年1月25日，FDA批准Kimmtrak（tebentafusp-tebn，IMCgp100）用于 HLA-A*02:01 阳性的无法切除或转移性葡萄膜黑色素瘤（mUM）成人患者。这是一种双特异性 gp100 肽-HLA 导向的CD3-T细胞接合剂。成为全球首个上市的TCR药。

2022年柳叶刀杂志上发表TCR-T疗法治疗晚期胰腺癌患者的病例引起众人关注。

患者女性，71岁，时确诊“胰头腺癌”4年，复发后伴胰腺炎和胆道狭窄。CA 19-9和其他肿瘤标记物的水平没有升高。

2018年，患者接受了四个周期的FOLFIRINOX（氟尿嘧啶、亚叶酸钙、伊立替康和奥沙利铂）新辅助治疗后，进行了保留幽门的低分化腺癌开放式Whipple切除术（最大尺寸为4.5 cm），边缘呈阴性，切除的21个淋巴结中有2个涉及淋巴结；治疗后的疾病分期为ⅡB（ypT3N1M0）。患者随后接受了四个周期的FOLFIRINOX辅助化疗，随后接受了剂量为50.4 Gy联合卡培他滨的辅助放化疗。

2019年，对该患者右下肺叶的一个增大结节进行细针针吸活检，确诊为肺转移。随后，患者出现无腹盆腔进展的无症状双肺疾病进展。

2020年，患者在匹兹堡大学医学中心参加了肿瘤浸润淋巴细胞治疗（TIL）的临床试验（NCT03935893），并接受了体外扩增的肿瘤浸润淋巴细胞和高剂量白细胞介素-2治疗，但在6个月内仍观察到肺转移瘤的生长。检测发现，患者肿瘤PD-L1的表达低于1%，肿瘤突变负荷为8.9个/Mb，微卫星稳定，存在KRAS G12D突变。此外没有检测到基因拷贝数变异或基因融合。患者HLA基因型为HLA-C*08:02。

2021年5月，美国FDA批准了一项单患者研究性新药申请。2021年6月，这位患者接受了这种新型治疗。

该胰腺癌肺转移患者接受了一次16.2×109个经过基因工程改造的自体T细胞回输治疗，这些T细胞被设计成可以克隆表达2种异基因的TCR，其MHC基因型限定为HLA-C* 08:02，同时具有KRAS G12D突变响应性，能够靶向识别KRAS G12D突变肿瘤产生的新抗原。体外试验证实这种改造过的T细胞对KRAS G12D突变具有高度特异性，当使用KRAS G12D突变多肽片段或RNA在体外刺激时，可以诱导T细胞分泌高水平的效应细胞因子，如γ-干扰素和肿瘤坏死因子（TNF）。

受到野生型或突变型KRAS G12D多肽或RNA体外刺激时，T细胞分泌的γ-干扰素和肿瘤坏死因子

经治疗后肺部肿瘤明显缩小，达到客观缓解，治疗后1个月时肺转移灶缩小了62%，6个月时达72%。回输的T细胞在体内持续存在，1个月时占循环中所有T细胞的13%，3个月时占3.3%，6个月时仍有2.4%。在治疗后3个月时，患者外周血中的改造T细胞在体外仍具有KRAS G12D突变响应性，能够在KRAS G12D突变多肽片段刺激下产生γ-干扰素和TNF，表明其免疫效应持续存在。

.治疗前以及治疗后85天和176天的胸部CT结果

2023年欧洲肿瘤内科学会（ESMO）年会报道了 ADP-A2M4CD8 T 细胞受体（TCR）T 细胞疗法单独或与纳武利尤单抗联合治疗实体瘤的SURPASS 试验I 期的临床和转化数据。

截至2023年3月9日，51例中位年龄为60岁（范围：31-75岁）、主要患有黑色素瘤、非小细胞肺癌、卵巢癌、胃食管癌、头颈部癌或尿道癌的患者接受了1.02-9.95x109 ADP-A2M4CD8 T细胞治疗。既往接受过治疗中位线数为为3（范围1-8），MAGE-A4表达H-评分为250（90-300）。T细胞疗法最常见的四种治疗相关不良事件是细胞因子释放综合征 [n=438 （74.5%）；7 例（13.7%）≥3级]、中性粒细胞减少症（27.5%）、发热和疲劳（各占21.6%）。经研究者审查按照RECIST v1.1标准确认的单药治疗患者（n=45）的总缓解率为 35.6% [2 例完全缓解，14 例部分缓解（PR）]。中位反应持续时间为20.79周（95%CI：11.6, 30.9）。在接受纳武利尤单抗联合治疗的患者中（n=46），有1例PR，3例病情稳定，2例无法评估（2例患者未接受纳武利尤单抗治疗，也未进行基线后RECIST评估）。ADP-A2M4CD8 在患者（包括接受纳武利尤单抗联合治疗）中继续显示出可接受的获益-风险特征。

全球在研的TCR-T项目中，70%以上适应症为实体瘤，主要包括转移性非小细胞肺癌、肝细胞癌、多发性骨髓瘤、软组织肉瘤、头颈癌、黑色素瘤、脂肪肉瘤和宫颈癌等。从靶点来看，癌-睾丸（CT）抗原依然是研发热点，靶向NY-ESO-1的项目数量位居前列。

（三）TIL细胞疗法

2024年ASCO大会报道的是一项单中心、研究者发起的开放标签单臂I期临床试验，在2021年9月-2024年1月期间，共入组20例复发卵巢癌患者，患者既往接受过中位2.5线（范围1～9）的化疗方案。其中，有10例（55.6%）患者接受PARP抑制剂，和2例（11.1%）患者接受免疫检查点抑制剂。患者在入组后，首先，接受肿瘤组织切除并运送到GMP，进行为期22-26天的制备；其次，将冷冻保存的输注产品运回临床中心；最后，所有患者均接受3天的淋巴细胞清除预处理、一次性输注PD-1单抗、GC203 TIL细胞。

GC203的采集制备及治疗过程

结果显示：通过中位随访时间为8.7个月（范围为2.9-18.8个月），研究者评估的确认ORR为33.3%（95% CI：16.3-56.3%），其中2例（11.1%）患者完全缓解（CR），4例（22.2%）患者部分缓解（PR），DCR为83.3%（95% CI：60.8-94.2%）。

中位PFS为5.5个月（范围为1.0- 14.1个月）；中位OS未达到，6个月和12个月OS率分别为75.6%（95% CI：57.4-99.6%）和68.8%（95% CI：49.3-95.9%）。

GC 203 TIL治疗卵巢癌的PFS和OS数据

安全性方面：最常见的不良事件为C反应蛋白水平升高（33%）、发热（33%）和疲劳（11%）。仅有1名患者出现3级不良事件（中性粒细胞减少症），未发生5级不良事件。大多数不良事件为1级或2级，可通过对症治疗缓解或治愈。

GC203无需IL-2注射、仅需低强度化疗预处理、普通病房内接受GC203回输治疗后，多例恶性程度高、多线治疗失败的妇科肿瘤患者肿瘤明显缩小，且长期缓解。其中，所有入组的宫颈癌患者，肿瘤均不同程度明显缩小；对铂类耐药的卵巢癌患者，可高比例客观缓解。3例患者肿瘤被完全清除，达到CR疗效。同时，接受TIL细胞回输并得到疾病控制的患者，未再行后续放化疗，生活质量得到明显改善。

除了上述研究以外，TIL细胞疗法在其他实体肿瘤治疗方面，也取得了重要进展。

（1）近期，国际顶级癌症期刊《CANCER DISCOVERY》上发表了一项2期 IOV-COM-202 研究 (NCT03645928) 的结果。

IOV-COM-202的研究是一项针对黑色素瘤，头颈癌，非小细胞肺癌接受TILs疗法的篮子研究，队列3B组为非小细胞肺癌组，共纳入了28名患者驱动基因阴性的NSCLC患者。入组的患者均为接受过免疫检查点抑制剂 (ICI) 或靶向治疗（有基因突变）后耐药及进展的极晚期，临床上已经没有特别的治疗方案。

此外，79.2% 的患者在接受研究治疗后肿瘤负荷减轻。缓解持续时间 (DOR) 范围为 1.1个月至 26.个月。

（2）一位晚期肺腺癌合并淋巴结、胸壁、胸膜及骨转移的患者，既往已行放疗及靶向治疗，疾病进展后接受GC101 TIL治疗，18周后复查CT示左侧胸壁病灶明显缩小。

（1）2022年ESMO会议上，首个评估TIL疗法在实体瘤中疗效的Ⅲ期研究结果公布。该研究探索了TILs治疗比对Ipilimuamb（3mg/kg Q3W up to 4次），在晚期黑色素瘤中的疗效。入组标准为最多一线治疗失败之后，不能接受过免疫的治疗。

研究共入组168例患者，86%是PD-1经治的患者（20%为辅助治疗，60%为晚期治疗），20%左右的患者LDH升高，BRAF突变约40%。中位随访33个月。该研究的TILs成功率非常高，在细胞治疗组84名患者中，只有4名患者最后没有接受治疗，其中只有1名是由于无法培养足量的TILs回输。疗效方面，首要终点PFS阳性。TIL和IPI组中位PFS分别为7.2个月和3.1个月（HR 0.50，P<0.001）。次要终点，ORR分别为49%和21%，CR率为20%和7%，OS为25.8个月和18.9个月（P=0.39）。安全性方面，无论是在治疗前的清淋化疗时期，还是在TILs IL2治疗期间，3级以上的毒性都要接近100%。相比而言，IPI组的3级毒性为57%，但未发生治疗相关的死亡。

该Ⅲ期研究，证实了TILs的治疗较IPI在晚期黑色素瘤后线治疗，特别是PD-1治疗失败后的，具有更佳的疗效。

（2）C-144-01是一项Ⅱ期临床试验，旨在评估Lifileucel（LN-144）在经抗 PD-1治疗和BRAFi±MEKi治疗后进展的晚期黑色素瘤患者的疗效和安全性。研究纳入了66例既往免疫（100%接受过PD-1单抗治疗，80%接受过CTLA-4单抗治疗）、靶向（23%）多线治疗后进展的晚期黑色素瘤患者，44%患者有肝或脑转移，平均靶病灶直径总和106mm，40.9%患者LDH水平升高。2021年ASCO年会上公布的数据显示，TIL治疗后客观缓解率（ORR）高达36.4%，其中2例达到完全缓解（CR），22例达到部分缓解（PR），疾病控制率（DCR）为80.3%，中位缓解持续时间（DOR）仍未达到。在黑色素瘤难治人群中取得了近40%的ORR，即使PD-L1阴性的患者也有响应，这给免疫耐药患者和难治患者带来了新的治疗希望。

临床试验患者治疗前后比较

基于上述研究，2024年2月16日，Iovance Biotherapeutics宣布，美国食品药品监督管理局（FDA）批准该公司的肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）疗法Amtagvi（lifileucel），用于治疗晚期黑色素瘤。lifileucel是首款获批的TIL疗法，也是首款获批治疗实体瘤的T细胞疗法。

患者接受TIL细胞治疗

在随后的9个月中，患者肺部的7个肿瘤中，有6个明显缩小，并最终消失。最后一个对治疗没有反应的肿瘤则通过手术被医生切除。

截止到2023年11月10日，共入组14名多线治疗失败的实体瘤患者入组（中位年龄49.0岁，92.9%的患者为女性），包含多种实体瘤，如小细胞肺癌、黑色素瘤和宫颈癌。患者入组后，研究医生选择合适的方案获取肿瘤组织以制备GT101（生产制备以及后续的质检约30天完成）。患者接受清淋化疗（环磷酰胺+氟达拉滨）后，回输GT101，剂量为≥5×10⁹ 个细胞，并输注IL-2(600,000IU/kg/剂，最多6次)。

结果显示：4例(28.6%)患者的最佳缓解为经确证的部分缓解(PR)，1例(7.1%)患者的最佳缓解为完全缓解(CR)，8例(57.1%)患者的最佳缓解为疾病稳定(SD)；1例患者为未确证的疾病进展(PD)。值得注意的是，在11/14例宫颈癌患者中，客观缓解率(ORR)为45.5%(5/11)，4例(36.4%)患者达到PR, 1例(9.1%)患者达到CR, 10/11例(90.9%)患者疾病得到控制，该队列的中位无进展生存期(PFS)为4.2个月。CR患者接受了长期随访，CR和PFS的持续时间(Kaplan-Meier估计)分别为24周和36周。 注射GT101后，所有患者外周血中的T细胞均扩增良好，中位达峰时间为6.83天，平均为15.9天。

众多成功案列，不胜枚举…………

TILs细胞疗法基本知识

（1）获得病人的肿瘤组织块，其中混杂着体积较大的肿瘤细胞以及体积小而圆的T淋巴细胞;

（2）肿瘤样本被运送到专有的GMP设施，在那里TIL被分离并繁殖，将不同种类的T淋巴细胞在细胞板上克隆化，并加入高浓度的IL-2来选择培养，在三周内产生数十亿TIL。

(3)在IL-2的刺激下不同种类的T淋巴细胞都得到了克隆扩增，形成了细胞群;

(4)用病人的肿瘤细胞和扩增后的T淋巴细胞反应，凡是能够发生杀瘤效应的T淋巴细胞群作为阳性TIL群留下，其余的丢弃;

(5)用负载了肿瘤特异性抗原的树突状细胞(DC)进一步扩增培养肿瘤特异性的TIL;

(6)患者开始一周的预处理治疗(清髓)以准备接受TIL。TIL产品作为一次性疗法使用，在TIL输注后立即接受多达6剂白细胞介素2(IL-2)，来支持患者体内TIL的生长和激活。

④TIL细胞与其他细胞的不同

（1）LAK、CD3AK、DC、CIK、NK等免疫细胞，均来自外周血，靶向性弱。

（2）TIL细胞来自于肿瘤组织内部，有60%以上能识别肿瘤细胞，有很强的靶向性。

（3）TIL细胞杀伤力高，比LAK强50-100倍。

(4)宿主处于免疫抑制状态，反而有利于增强TIL的杀伤作用，适合与放化疗联用。

(5)TIL细胞的扩增能力比LAK细胞强。

(6)采用定向筛选技术后，TIL的疗效显著增强，且通常只需要注射一次。

（四）CIK细胞疗法

细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine-induced killer cells，CIK）疗法由于细胞来源易于获取和强大的控瘤活性，已在肿瘤免疫治疗中广泛应用。CIK疗法常与其他治疗手段联用，如联合放化疗、射频消融、免疫检查点抑制剂治疗等。放化疗、射频消融可诱导稳定的肿瘤特异性T细胞反应，可进一步增强肿瘤特异性免疫反应，免疫检查点抑制剂治疗可有效打破抑制性的肿瘤微环境，联合应用CIK细胞可有效抑制肿瘤细胞生长，甚至杀灭肿瘤，且CIK细胞的抗肿瘤效应对机体无显著毒副反应，在无法确定肿瘤特异性抗原或对抗原了解相对较少情况下，应用CIK细胞作为肿瘤放化疗和术后辅助治疗有重要意义。在食管癌、鼻咽癌、乳腺癌、消化系统肿瘤及膀胱癌中均能有效延长患者生存期。

（五）NK细胞疗法

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CAR-NK细胞疗法在肿瘤治疗领域进展

2021年12月CAR-NK细胞疗法临床试验数据统计

国内首个“现货型”CAR-NK临床试验获药监局批准：2021年11月11日，国家药监局药品审评中心通过了一款我国自主研发的针对“晚期上皮性卵巢癌治疗的靶向间皮素（Mesothelin,MSLN)嵌合抗原受体NK细胞（CAR-NK）注射液”（简称：CAR-NK注射液）的临床试验申请。

“现货型”CAR-NK疗法向“癌王”胰腺癌发起进攻：近年来，随着医学临床研究的深入，人们发现大约60%~80%的胰腺癌表达前列腺干细胞抗原（PSCA），CytoImmune与City of Hope合作开发了一种针对PSCA的嵌合抗原受体（CAR），用于转导到人类自然杀伤 （NK）细胞中，还敲入了分泌性IL-15，维持NK细胞的存活。

研究团队采用CYTO NK-203疗法（一种现成的同种异体 CAR-NK 细胞疗法，源自脐带血，可以提高NK细胞安全性和杀伤功效的一种潜在的疗法），在人类转移性胰腺癌小鼠模型中发现以PSCA为靶点的“现成”的CAR-NK疗法能够显著抑制胰腺癌：在小鼠体内持续存活超过90天，显著延长其寿命，且未显示出治疗相关毒性。

2022年1月10日，Fate Therapeutics公司宣布， 美国FDA已批准FT536的新药临床研究（IND）申请。FT536是一款经过多重工程修饰、诱导多能干细胞（iPSC）衍生的 “即用型”CAR-NK细胞疗法，FT536表达一种特异性靶向I类主要组织相容性复合体（MHC）相关蛋白A和B(MICA/MICB)α3结构域的新型CAR。MICA和MICB属于应激蛋白，在许多实体瘤上高水平表达。 此次FT536获批临床研究， 表明MICA和MICB正在成为广泛的实体瘤中令人兴奋的癌症免疫疗法靶标。关于此款疗法的多中心I期临床试验开展的肿瘤类型包括：晚期非小细胞肺癌、结直肠癌、头颈癌、胃癌、乳腺癌、卵巢癌和胰腺癌。

2019年我国研究学者发表靶向NKG2D的CAR-NK细胞治疗结直肠癌患者研究，其初步疗效值得肯定。3例转移性结直肠癌患者，前两例患者腹腔输注低剂量 CAR-NK 细胞后，可观察看腹水生成量减慢以及腹水样本中肿瘤细胞的数量急剧减少；第三例肝转移瘤患者采用超声引导下瘤内经皮注射和腹腔内灌注方式输注 CAR-NK细胞后，多普勒超声可见肝部肿瘤快速缩小，(PET-CT）提示经治疗的肝病灶为完全代谢反应。3 例患者在治疗过程中均无出现3级或以上的不良事件。

波兰罗兹医科大学研究者在国际分子科学杂志（International journal of molecular sciences）发表了关于CAR-NK细胞治疗实体瘤的综述，该综述中提到一项CAR-NK治疗胰腺导管腺癌伴肝转移的案例：一名46岁男性胰腺癌患者被诊断为胰腺导管腺癌（PDAC）伴肝转移（T4N1M1，Ⅳ期），该患者接受ROBO-1特异性CAR-NK细胞输注治疗。治疗前，胰腺病变伴有淋巴浸润和肝脏多处高代谢病变，每周输注ROBO-1导向的CAR-NK细胞和瘤内注射（肝转移）治疗。5个月内胰腺病变和肝转移得到控制。

a、b治疗前，胰腺病变；c、d5个月内得到控制

此外，NK细胞疗法有多种组合治疗方式，旨在提升NK细胞存活率和活化率、驱动NK细胞向肿瘤部位迁移、增强免疫抑制微环境抗性、发挥ADCC药物治疗能力以及通过靶向免疫调节从而增强细胞毒性功能。包括：NK细胞引发剂、过继细胞疗法、抗体、酪氨酸激酶抑制剂、小分子抑制剂、引发剂和NK细胞结合剂等。

与CAR-T细胞相比，CAR-NK细胞有显著优势

④可对CAR-NK细胞进行改造，使其靶向多种抗原，增加对实体瘤的浸润，克服耐药的肿瘤微环境，最终实现有效抗肿瘤反应。

据Clinicaltrials.gov显示，CAR-NK疗法相关临床试验超过80多项，其中实体瘤，涵盖胶质母细胞瘤、肺癌、结直肠癌、胰腺癌、肝细胞癌、乳腺癌等多个瘤种，涉及Her-2、Trop2、GPC3等多个靶标。